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2019年底出現(xiàn)了一種新型的嚴重呼吸道疾病。 根據(jù)該病的病因這種新型冠狀病毒被命名為嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2型 (SARS-CoV-2; formerly 2019-nCoV) (Lake 2020; Gorbalenya et al. 2020)。
SARS-CoV-2與2002年和2003年描述的嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒 (severe acute respiratory syndrome coronavirus ; SARS-CoV) 同源性為79% (Lu et al. 2020; Zhou et al. 2020)。這兩種病毒都屬于冠狀病毒科,是一類出現(xiàn)在多種物種中的包膜、線性單股正鏈RNA病毒。大多數(shù)冠狀病毒只會造成輕微的呼吸性傳染病,只有中東呼吸綜合征冠狀病毒可引起嚴重的致死率。
SARS-CoV和SARS-CoV-2的轉移膜刺突糖蛋白 (transmembrane spike (S) glycoprotein) 可連接宿主細胞中的hACE-2受體,從而進入宿主細胞 (Tortorici and Veesler, 2019; Zhou et al. 2020)。
刺突糖蛋白 (S Glycoprotein) 包含兩個功能亞基和一個介導連接宿主細胞的S1亞基。S蛋白具有非常強的免疫原性,當它介導連接宿主細胞受體時,中和抗體通常是受體連接區(qū)域 (receptor binding domain; RBD) 的目標 (Amanat et al. 2020)。基因序列顯示S基因編碼受體連接的刺突蛋白與其它CoV 的刺突蛋白有很大的不同。除了一個核苷酸與原始的蝙蝠病毒RaTG13相似度為93.1%以外,其它核苷酸序列與已知的SARS冠狀病毒的核苷酸相似度少于 75% (Zhou et al. 2020)。
與SARS-CoV序列相比較SARS-CoV-2中S基因的蛋白序列在N端結構域中有3小段的插入,而且在受體連接區(qū)域中多數(shù)重要殘基也有所不同 (Zhou et al. 2020)。這種較高的分歧部分對于血清學檢測是一個很好的標靶,旨在抗體應答中區(qū)分兩種SARS病毒,以及冠狀病毒引發(fā)的普通感冒。
核衣殼蛋白 (nucleocapsid protein; N) 與基因組RNA結合形成復合物,可與病毒膜蛋白進行相互反應,似乎扮演著在病毒轉錄和聚集中提高效果的重 要角色 (McBride et al. 2014)。 較早的SARS-CoV文 獻中已提及N蛋白和S蛋白一樣都是一種高度免疫原性蛋白 (Qiu et al. 2005)。
典型的免疫反應IgM抗體通常是第一道防線。血清轉換到IgG發(fā)生在疾病的中后期,這些高親和力的IgG抗體負責長期免疫和免疫記憶 (Li et al. 2020; Racine et al. 2009)。
在疾病發(fā)生過程中由于抗體出現(xiàn)的較晚,人們更傾向于用分子學方法檢測新冠病毒2型。由于分子檢測受靈敏度的限制,在患者有癥狀但PCR檢測假陰性的情況下,血清學可以增加確診的可能性 (Farnsworth and Anderson 2020; Xu et al. 2020)。 此外,血清學檢測在進行大規(guī)模篩查和檢測潛在免疫中起著重要的作用,這樣可以確認康復的個體是否可以捐獻血清,并且可以幫助確認中和抗體在免疫應答方面的研究 (Amanat et al. 2020; Farnsworth and Anderson 2020; Okba et al. 2020)。
研發(fā)高靈敏感度的血清檢測試劑的先決條件之一是要擁有高質的原材料,這樣才能準確的從病患者中區(qū)分健康個體。其中核心原材料-抗原能有目標的捕獲患者的抗體。DIARECT新研發(fā)的SARSCoV-2核衣殼蛋白N和刺突糖蛋白S適用于不同的血清學檢測方法。DIARECT生產(chǎn)的抗原與患者血清有較高的反應,而與樣本相比較有著非常低的背景 (圖 2)。
DIARECT生產(chǎn)的SARS-CoV-2抗原表達于桿狀病 毒昆蟲細胞表達系統(tǒng)。
產(chǎn)品訂購信息:
貨號 | 品名 | 規(guī)格 |
46000 | SARS-CoV-2 Nucleocapsid (N) Protein | 0.1mg |
46001 | 1mg | |
46100 | SARS-CoV-2 Spike (S) Glycoprotein RBD | 0.1mg |
46101 | 1mg |